痰液细胞提取

1、估算并记录痰液样本体积。此处奉上工具，痰液就不放图了，怪恶心的。

2、在痰液标本中加入4倍体积的 0.1%DTT溶液，2000rpm涡旋混匀，室温孵育1猱蝰逾鸾5min。期间要不断涡旋震荡，直至团块消失，痰液全部匀质化。

3、取1000ul醺尬汰栎液化后的痰液，至洁净15ml离心管中，加入5ml 1×PBS涡旋混匀，500g离心5min。离心机如图，尽量选用水平离心机，这种离心机分离细胞效果好。

4、弃上清，在沉淀中加入2ml 1×PBS缓冲液洗涤细胞，经过70um细胞滤网过滤，500g离心5min，弃上清，收集细胞沉淀。

5、用1ml PBS重悬细胞，显微镜下观察，效果图如下，所得细胞可用于流式细胞术检测或其他实验检测。有些不标准的痰液，如泡沫痰，是得不到很多细胞的。白细胞形状为圆形，直径7-8um很好辨认。另外痰液中也可能含有鳞状上皮细胞，体积大，直径约50um，形状不规则。